深圳凱米斯科技有限公司為您提供全面的制備液相色譜分離/純化優(yōu)化方法，制備色譜柱的選擇方法等。

一、制備色譜柱的選擇方法

1、分離模式的選擇（在樣品可能分離的條件下使用分析色譜柱進行測試）

如果樣品有多種可分離的模式，請在選擇上考慮以下幾點

1）分離的效率：分離能力、樣品上樣量、制備時間；

2）經(jīng)濟性：填料、流動相的成本、單位時間的處理量；

3）其他：安全性、目標成分的變性、系統(tǒng)的簡易性。

2、制備規(guī)模的選擇

根據(jù)樣品的處理量選擇制備柱的內(nèi)徑以及填料的粒徑。表1列舉了選擇制備柱內(nèi)徑和填料粒徑的基本標準。

1）制備柱內(nèi)徑

樣品的上樣量與制備柱的橫截面積是成正比的，所以必須要選擇適合樣品上樣量的制備柱內(nèi)徑。

2）填料的粒徑

填料的粒徑越小制備柱的柱效越高，同時填料的價格也越高。另外由于柱壓也會變高，因此對所使用設備的耐壓性要求也會相應的提高。

在目標成分與相近的峰分離不充分等情況下，可選擇使用粒徑小的填料來提高分離效果。反之，粒徑越大制備柱的柱效就越低，當然填料的價格也更便宜，柱壓也會隨之降低。

3）制備柱的長度

柱長越長分離能力就越高，樣品的上樣量也會增加。但由于柱長和柱壓成正比，因此柱子越長柱壓也就越高。

二、制備條件的優(yōu)化

根據(jù)使用的粒徑確定制備條件

使用已確定粒徑大小的填料對樣品的分離進行測試。測試時使用分析色譜柱，并對制備條件進行優(yōu)化

為了能更有效地進行制備條件的摸索,我們推薦使用YMC-Pack R&D系列色譜柱。

1、洗脫條件的優(yōu)化

制備不同于分析,首先要考慮的是更有效地得到更高純度的目標成分和高收率。進行高效制備的關鍵點是在考慮必須分離的物質(zhì)和其余物質(zhì)的基礎上來設定洗脫條件。

由于制備所用的填料粒徑比分析用的填料粒徑大,因此柱效會有所降低，可能得不到一些必要的分離。在這種情況下,通過調(diào)整洗脫條件及降低線流速可改善分離。

即使這樣分離仍然不充分的話,可嘗試改變柱長和填料粒徑。

2、上樣量的摸索

分階段增加上樣量,從而求得能得到目標純度的最大上樣量。然后根據(jù)最大上樣量來計算放大到制備色譜柱的上樣量。

3、制備裝置的合理性確認

實際進行制備時首先需確認流速和柱壓等是否適合設備的性能。如果要在制備柱上取得和分析測試時一樣的分離效果,線流速必須要與分析測試時柱的數(shù)值保持一致，制備柱的流速可通過按測試用柱的流速的橫切面積的正比來設定，從而獲得相同的線流速。

如果線流速是一致的，那制備柱的壓力和測試用柱的壓力也是相同的。

如果柱壓超過設備的耐壓限度,必須改變流速、柱長等條件。并且管線等也需要更改為適合流速的尺寸

三、制備的實施

實際進行制備生產(chǎn)時,須確認收率和純度。

四、YMC-Pack制備色譜柱一覽表：

● 常規(guī)生產(chǎn)型號

▲  需按要求定制

粒徑um 柱尺寸mm	球狀填料
	5	10	15	20	50
20×250	●	●	●	●	▲
20×500	●	●	●	●	▲
20×1000		●	●	●	▲
30×250	●	●	●	●	▲
30×500		●	●	●	▲
50×250	●	●	●	●	▲
50×500		●	●	●	▲
50×1000			▲	▲	▲
100×500		▲	▲	▲	▲
100×1000			▲	▲	▲
150×500				▲	▲
150×1000				▲	▲
200×500				▲	▲
200×1000				▲	▲

 

上一篇: 聯(lián)系我們

下一篇: YMC-Triart系列反相色譜柱